分光光度法

　　分光光度法是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的光吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。

　　常用的波長范圍為：（1）200～400nm的紫外光區(qū)；（2）400～760nm的可見光區(qū)， （3）2.5～25μm（按波數(shù)計(jì)為4000～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外分光光度計(jì)、可見分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。為保證測(cè)量的精密度和準(zhǔn)確度，所有儀器應(yīng)按照國家計(jì)量檢定規(guī)程或本附錄規(guī)定，定期進(jìn)行校正檢定。

　　單色光輻射穿過被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí)，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關(guān)系如下式：1 a=1g ─ =ecl t式中 a為吸收度；t 為透光率；e 為吸收系數(shù)，采用的表示方法是（e1％ 1cm），其物理意義為當(dāng)溶液濃度為1％（g/ml），液層厚度為1cm時(shí)的吸收度數(shù)值；c 為100ml溶液中所含被測(cè)物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計(jì)算），g；l 為液層厚度，cm.物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收波長，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后，可用同樣條件將該供試品配成溶液，測(cè)定其吸收度，即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對(duì)光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收，但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測(cè)定，故又稱比色分析。由于顯色時(shí)影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測(cè)定時(shí)應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r(shí)操作。