一：六一散含量測定方法

　　六一散處方為：滑石粉600g，甘草100g.

　　2005《中國藥典》六一散含量測定項下：

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-磷酸二氫銨溶液（取磷酸二氫銨1.725g，加水300ml使溶解，用磷酸調節(jié)ph值至3.5）（65：35）為流動相；檢測波長為250nm.理論板數(shù)按甘草酸峰計應不低于3000.

　　供試品溶液的制備：取本品約1.5g，精密稱定，精密加入流動相25ml，稱定重量，超聲處理（功率250w，頻率33khz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用流動相補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

　　文獻報道的以甘草酸單銨為指標的，如：陳建華等用hplc法測定六一散中甘草酸單銨的含量，高效液相色譜儀為waters 510/ 484/ 75b 色譜系統(tǒng)。采用hypersil c18 （4.6×150，5μ） 分析柱，流動相為甲醇-含3 %冰醋酸的0.2mol/ l醋酸銨溶液（62：38），流速1.2ml/min，檢測波長250nm，柱溫室溫。樣品用流動相超聲處理，結果甘草酸單銨的線性范圍1.6～8μg， 平均加樣回收率為99.4%.

　　二：六應丸含量測定方法

　　六應丸處方為：丁香，蟾酥，雄黃，牛黃，珍珠，冰片。

　　2005《中國藥典》六應丸含量測定項下：

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.5%磷酸二氫鉀溶液（50：50）（用磷酸調節(jié)ph值至3.2）為流動相；檢測波長為296nm.理論板數(shù)按華蟾酥毒基峰計應不低于9000.

　　供試品溶液的制備：取本品適量，研細，取約0.3g，精密稱定，精密加入甲醇20ml，稱定重量，加熱回流1.5小時，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

　　文獻報道的以華蟾蜍毒基為指標的，如：黃東亮等應用HPLC法測定六應丸中蟾毒內酯的含量，島津LC-10A型高效液相色譜儀，色譜柱為250mm×416mm，固定相為Spheriso rb C18，5μm，流動相為甲醇-水（60：40），流速1ml/min，檢測波長299nm.樣品用乙醇超聲處理。

　　其它指標，如：陳斌等采用超臨界流體萃取技術和毛細管氣相色譜的聯(lián)用技術測定中成藥六應丸中冰片和丁香酚的含量。氣相色譜儀為HP-5890 SeriesⅡ，F(xiàn)ID檢測器，25m×0.32mm，0.52μm，HP-5色譜柱（crosslinked 5%Ph Me Silicone）。SFE的最佳萃取條件為：壓力48.2Mpa，溫度60℃，改性劑量0.2ml，靜態(tài)萃取時間10min.色譜條件：氣化溫度250℃，檢測器溫度270℃，柱溫160℃，載氣N2，柱頭壓55kPa，分流比100：1，內標為麝香草酚。

　　倪坤儀等使用自制的1-溴乙?；鶎ο趸綖檠苌噭?，制成對硝基苯甲酰甲基酯，在254nm檢測，分離測定了牛黃及其制劑（六應丸等）中膽酸、豬去氧膽酸等的含量。［醫(yī)學 教育網 搜集 整理］

　　牛黃解毒片含量測定方法

　　牛黃解毒片處方為：人工牛黃5g，雄黃50g，石膏200g，大黃200g，黃芩150g，桔梗100g，冰片25g，甘草50g.

　　2005《中國藥典》牛黃解毒片含量測定項下：

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水-磷酸（45：55：0.2）為流動相；檢測波長為315nm.理論板數(shù)按黃芩苷峰計應不低于3000.

　　供試品溶液的制備：取本品20片（包衣片除去包衣），精密稱定，研細，取0.6g，精密稱定，置錐形瓶中，加70%乙醇30ml，超聲處理（功率 250w，頻率33khz）20分鐘，放冷，濾過，濾液置100ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液濾入同一量瓶中，加70%乙醇至刻 度，搖勻；精密量取2ml，置10ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻，即得。

　　文獻報道的以黃芩苷為指標的，如：吳麗群用hplc法 測定牛黃解毒片中黃芩苷的含量，采用agilent-1100高效液相色譜儀，色譜柱為diamonsic18，200×4.6mm id，5μm，流動相為甲醇-0.1%磷酸溶液（55：45），檢測波長274nm，柱溫室溫，流速1.0ml/min.樣品用70%乙醇超聲處理，結果 回收率為101.6%，rsd小于1.3%.

　　李靜瑜用hplc法測定牛黃解毒片中黃芩苷的含量，采用惠普hp1100高效液相色譜儀，色譜柱為hp hypersil-ods（5μm，125×4mm），流動相為甲醇-水-磷酸（45：55：0.2），檢測波長315nm，柱溫室溫。

　　陳勝璜用雙波長法測定牛黃解毒片中黃芩甙的含量，采用日本島津uv-265紫外分光光度計，雙波長為240.2nm和278.0nm，樣品用75%甲醇超聲處理。

　　以蒽醌類為含量測定指標的文獻報道較多，如：李太平等用hplc法測定了大黃素、大黃酸的含量，采用島津lc-10avp液相色譜儀，色譜柱為 diamonsil （tm 鉆石），c18柱（20cm×4.6，5μm），流動相為甲醇-水-磷酸（720：280：1），檢測波長254nm，流速1.5ml/min，柱溫 30℃。樣品用甲醇超聲處理后用鹽酸水解、氯仿提取，結果大黃素進樣量在0.469～1.407μg時呈良好的線性關系（r=0.9992），大黃酸在進 樣量為0.3125～0.9375μg時呈良好的線性關系（r=0.9992），加樣回收率分別為98.2 %（大黃素）， 98.4%（大黃酸），rsd分別為0.43%（大黃素），0.72%（大黃酸）。［醫(yī)學教育 網 搜集整理］

　　楊冬梅等用薄層掃描法測定了大黃素的含量，采用島津cs-930薄層掃描儀，以石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）的上層溶液，硅膠g板，λs=440nm，λr=560nm.樣品用乙醚超聲處理。

　　以膽酸為指標的，如：凌麗美用薄層掃描法測定了膽酸的含量，以異辛烷-正丁醚-冰醋酸（8：5：5）為展開劑，10%硫酸乙醇溶液為顯色劑，雙波長反射 法鋸齒掃描λs=390nm，λr=650nm.樣品的處理方法：用甲醇超聲提取，再用20%氫氧化鈉回流提取，用稀鹽酸調節(jié)ph值至2，用醋酸乙酯提取。

　　四物合劑處方為：當歸250g，川芎250g，白芍250g，熟地黃250g.

　　2005《中國藥典》四物合劑含量測定項下：

　　色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以異丙醇-甲醇-醋酸-水-（2：25：2：71）為流動相；檢測波長為230nm.理論板數(shù)按芍藥苷峰計應不低于2000.

　　供試品溶液的制備：精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

　　文獻報道的方法一般以藁本內酯為指標，如：苗愛東等用spe-hplc測定四物合劑中藁本內酯的含量，采用美國waters高效液相色譜系統(tǒng)，色譜柱為 phenomenex luna c18 （ 5μm，4.6mm×150mm），流動相為甲醇-水（ 65：35），流速1ml/min，溫度35℃，檢測波長325nm.樣品用水超聲處理后用已處理好的high capacity c18固相萃取柱（10ml甲醇活化， 5ml水平衡）處理，取甲醇洗脫液。藁本內酯在0.175～0.7μg范圍內線性關系良好（r =0.9999），平均回收率100.2，rsd為1.6 （n =6）。