【概述】

　　衣原體（chlamydial）是一群在光學(xué)顯微鏡下可以觀察到的細胞內(nèi)微生物，部分僅引起人類疾病，有些則可導(dǎo)致人與禽類動物共同感染。衣原體所引起的疾病近年來漸見增多，且有新種發(fā)現(xiàn)。

　　【生物學(xué)特性】

　　以往認為衣原體是病毒，但其后發(fā)現(xiàn)該病原與病毒不同之點為：①含有DNA及RNA兩種核酸；②具有由粘肽組成的細胞壁；③有酶系統(tǒng)，可進行一定的代謝活動，合成蛋白；④按二分裂方式繁殖，有獨特的生活周期；⑤含核糖體；⑥其生長可為部分抗生素所抑制。衣原體不能合成ATP，需由宿主細胞供給。

　　衣原體與立克次體的區(qū)別為：①無需媒介物傳播；②立克次體可主動鉆入宿主細胞，而衣原體則以被動方式，通過宿主細胞吞飲入，并在吞噬細胞內(nèi)存在；③衣原體感染細胞后，在其內(nèi)形成特異性包涵體。

　　衣原體與細菌的異同點見表11-20

表11-20　衣原體、病毒及細菌之比較

　　每個細胞繁殖周期約24～48小時，衣原體發(fā)育有兩個階段，細胞外期為原生小體（elementary body），在細胞內(nèi)則演變?yōu)榫W(wǎng)狀體（reticulate body）。前者的直徑約0.3nm，中央有致密的類核結(jié)構(gòu)，為具感染性的小顆粒。原生小體進入宿主細胞后，細胞表面膜即形成一個空泡，將其包圍起來，約6～8小時后原生小體在細胞內(nèi)逐漸增大而成網(wǎng)狀體。后者直徑約0.5～1nm，不具電子致密的核質(zhì)體，通過二分裂方式增殖，使空泡內(nèi)充滿小顆粒，稱"包涵體".小顆粒可從宿主細胞釋出而再感染新的細胞。它可感染同一宿主的不同細胞，也可通過感染性滲出物感染他人，或以性交，使原生小體通過粘膜傳入。

　　【分型說明】

　　衣原體含有共同的群抗原（即補體結(jié)合抗原），依其抗原性質(zhì)、形態(tài)和胞質(zhì)中所含糖原的不同，可將衣原體分為三類。

　　1.沙眼衣原體（稱I屬或A亞型衣原體）形成的包涵體較堅硬，占據(jù)了宿主細胞核的位置，含致密的糖原；沙眼衣原體對磺胺嘧啶敏感。

　　2.鸚鵡熱衣原體（又稱Ⅱ?qū)倩駼亞型），對磺胺耐藥，新形成的包涵體較大，裂解時，分布于細胞核周圍，不含糖原。以上二型鑒定的方法除傳統(tǒng)的糖原染色及包涵體的形態(tài)學(xué)外，近來還可用單克隆抗體來鑒別。

　　3.肺炎衣原體，即TWAR因子。

　　沙眼衣原體及鸚鵡熱衣原體含同一脂多糖抗原，但二者僅含10％的同種的DNA，新種TWAR所含的DNA則與以上二個種無關(guān)，限制性內(nèi)切酶也不同。

　　依據(jù)多糖抗原不同，沙眼衣原體又可分為15個血清型，即A、B、Ba、C、D、E、F、、H、、J、K、L1、L2和L3；其中A、B、Ba、C則引起沙眼，L1、L2和L3則引起性病淋巴肉芽腫，而D、E、F、G、H、I、J和K則可導(dǎo)致包涵體結(jié)膜炎嬰兒肺炎及非淋病性尿道炎（見表11-21）。鸚鵡熱及肺炎衣原體，目前僅知各含一個血清型。

　　衣原體對熱較敏感，56℃5～10分鐘即可使其滅活，常用消毒劑如0.1％甲醛、0.5％石炭酸1∶2000水及90％乙醇等均能殺滅衣原體。表11-21示不同衣原體所致疾病。

表11-21　衣原體所致病

　　其他由衣原體引起的疾病有：附睪丸、直腸炎、粘液膿性宮頸炎、子宮內(nèi)膜炎、前庭大腺炎、輸卵管炎、肝周圍炎Reiter綜合征、結(jié)膜炎等。

　　【診斷說明】

　?。ㄒ唬┛乖瓩z測

　　1.直接涂抹染色（DT）法 傳統(tǒng)的結(jié)膜刮片和宮頸拭子經(jīng)姬姆薩或碘染色檢查上皮細胞漿內(nèi)有無包涵體是衣原體檢查常用的篩選試驗。如果操作和標(biāo)本采取得當(dāng)，其特異性強，結(jié)果可靠，但敏感性差，尤其是碘染色，只能檢查含糖原的包涵體。

　　2.細胞培養(yǎng)法 用于衣原體培養(yǎng)者，常用經(jīng)放線菌酮處理的單層McCoy細胞。經(jīng)孵育后，用熒光標(biāo)記的抗體、酶結(jié)合的單克隆抗體、碘或姬姆薩染色，胞漿中出現(xiàn)特征性的包涵體，即可考慮有衣原體的存在。本法的敏感性為80％～90％。由于細胞培養(yǎng)法費時費力，且條件和技術(shù)要求較高，不能作為臨床常規(guī)檢查方法，因此不適用于大規(guī)模篩選及流行病學(xué)調(diào)查。

　　3.酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）ELISA是用來檢測臨床標(biāo)本中衣原體抗原的一種有效方法。所用抗體多為衣原體屬脂多糖單克隆或多克隆抗體，特異性強。本法對嬰兒結(jié)膜炎檢測的敏感性和特異性分別為88％和94％，鼻咽部感染檢出率和特異性分別為87％和92％。以此法檢測1529例生殖道標(biāo)本，并與培養(yǎng)法結(jié)果比較，其敏感性男性為91％，女性為88％；特異性均為99％。本法具有簡便快速的特點，適用于大量標(biāo)本的檢測，但與細菌有交叉反應(yīng)，可出現(xiàn)假陽性，尤其是鼻咽部標(biāo)本。

　　4.直接免疫熒光法（DFA） 本法簡便、快速、特異性好，敏感性和特異性隨標(biāo)本部位及人群而異。新生兒結(jié)膜炎的陽性率達100％，（而組織培養(yǎng)為94％）鼻咽部標(biāo)本的敏感性為85％，特異性為75％。宮內(nèi)膜和輸卵管等部位的標(biāo)本較培養(yǎng)法敏感。它還用于精液、直腸及因運輸或保存不當(dāng)使衣原體失活標(biāo)本的檢測。用多克隆熒光抗體檢測可診斷衣原體感染，但不能區(qū)別其類型，單克隆熒光抗體可直接定型，識別的是沙眼衣原體的原生小體，而非較大且少見的細胞內(nèi)包涵體。熒光顯微鏡的質(zhì)量和操作技術(shù)均可影響結(jié)果。對操作熟練者來說，本法的敏感性和特異性至少和ELISA相同。DFA可代替細胞培養(yǎng)法，以篩選生殖道感染中等至高度流行的年輕人群及確診有癥狀的新生兒結(jié)膜炎。

　　5.斑點免疫結(jié)合法（DIBA）本法是以微孔薄膜作固相載體，吸附抗原后進行的抗原抗體反應(yīng)，在膜上出現(xiàn)著色斑點為陽性結(jié)果。其敏感性為100％，特異性為92.4％。與細胞培養(yǎng)法比較，其符合率為96.7％。DIBA適用于大批量標(biāo)本的檢測，但結(jié)果需3天。

　　6.核酸探針 隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，DNA雜交技術(shù)已進入衣原體檢測領(lǐng)域。以82S標(biāo)記7Md質(zhì)粒制備的探針，檢出Ct的敏感性和特異性分別為91％和80％。用沙眼衣原體性病淋巴肉芽腫（LGV）-Ⅱ的質(zhì)粒DNA和LGV-I的染色體DNA作探針，可特異性地檢測沙眼衣原體的15個血清型抗原，而與單純皰疹病毒（HSV），淋球菌等41種微生物無交叉反應(yīng)。檢測范圍可達10～100pgDNA.用血清學(xué)、單克隆抗體及組織培養(yǎng)鑒定為陰性的某些標(biāo)本，用DNA探針檢測可得到陽性結(jié)果。用沙眼衣原體TE-55株全DNA制備分子探針，能特異性地檢出衣原體的15個血清型。該探針具有特異性高，敏感性強，完全有可能用于衣原體的臨床診斷和分子流行病學(xué)調(diào)查。原位DNA雜交用于宮頸刮片和直腸活檢標(biāo)本，其結(jié)果與培養(yǎng)相似。但也有認為，在生殖道標(biāo)本檢測中，DNA探針不夠敏感，特別是培養(yǎng)為弱陽性的標(biāo)本。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)

　　7.聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）PCR是近年發(fā)展起來的新技術(shù)，能使核酸分子按幾何級數(shù)擴增，使樣品中極微量的核苷酸分子迅速地擴增，然后通過核酸分子的檢測獲得極敏感的結(jié)果。PCR簡便快速，具有高度的敏感性和特異性，且可同時從標(biāo)本中直接鑒定衣原體的種和型別。從7.5Kb質(zhì)粒ORF-3選擇了一對具有種特異性引物，經(jīng)40次PCR循環(huán)，電泳檢測的靈敏度達10-17gDNA.

　?。ǘ┛贵w檢測 抗體檢測的價值不大，因生殖道感染無并發(fā)癥者仍產(chǎn)生低滴度的抗體；約20％急性衣原體尿道炎患者不產(chǎn)生抗體；有人認為IgA意味著現(xiàn)癥感染，但PID者可長期存在IgA.衣原體抗體檢測的常用方法有以下幾種。

　　1.補體結(jié)合試驗（CFT）適用于LGV、鸚鵡熱及肺炎衣原體感染的診斷，其敏感度較低。當(dāng)效價≥1∶32提示為衣原體感染，但不能鑒別其種類。用于LGV的證實試驗，要求效價≥1∶64.

　　2.微量間接免疫熒光試驗 本試驗是診斷肺炎衣原體感染最敏感的方法之一。以肺炎衣原體作為抗原進行試驗，檢測特異性抗體。若雙份血清效價呈4倍增加，或單分血清IgM抗體效價≥16，或IgG抗體效價≥512，可診斷為急性感染。既往感染者的IgG抗體效價介于8～256之間。臨床上依據(jù)血清學(xué)試驗可將肺炎衣原體感染分為原發(fā)和繼發(fā)兩種。原發(fā)感染IgM出現(xiàn)早、效價高，IgG出現(xiàn)較晚，IgA反應(yīng)較弱或不出現(xiàn)。繼發(fā)感染IgG反應(yīng)迅速，一般不出現(xiàn)IgM和CF抗體。因此，抗體檢測應(yīng)根據(jù)標(biāo)本采集時間，結(jié)合臨床資料綜合分析才能得出正確結(jié)論。

　　【治療說明】

　　沙眼衣原體對四環(huán)素、多西環(huán)素、米諾環(huán)素、紅霉素、利福平均敏，而且對磺胺類藥物如復(fù)方磺胺甲噁唑（SMZ-TMP）也敏感。β-內(nèi)酰胺、氨基糖甙類抗生素及萬古霉素、壯觀霉素?zé)o效。有效治療的療程需7～21天。

　　鸚鵡熱肺炎及衣原體肺炎均需采用四環(huán)素類及紅霉素?；前奉悷o效。

　　【預(yù)防說明】

　　外膜抗原為主要的疫苗候選抗原，但尚無獲突破性進展。

　　鸚鵡熱肺炎、肺炎衣原體肺炎的治療、預(yù)防見呼吸系統(tǒng)篇。