血清總蛋白測定法:
血清總蛋白測定一般采用雙縮脲比色法,它是目前首先推薦的蛋白質定量方法。此法的原理是蛋白質分子中的肽鍵在堿性條件下與二價銅離子(Cu2+)作用生成藍紫色的化合物,這種顏色反應強度在一定濃度范圍內與蛋白質含量成正比,經與同樣處理的蛋白標準液比較,即可求得蛋白質含量。此反應的優(yōu)點是清、球蛋的反應性相近,操作簡單,重復性好,干擾物質少,為首選的常規(guī)方法,其缺點是靈敏度較低。
原理:
血清(漿)中蛋白質的肽鍵(一CO—NH一)在堿性溶液中能與2價銅離子作用生成穩(wěn)定的紫紅色絡合物。此反應和2個尿素分子縮合后生成的雙縮脲(H2N—OC—NH—CO-NH2)在堿性溶液中與銅離子作用形成紫紅色的反應相似,故稱之為雙縮脲反應醫(yī)|學教育網整理。這種紫紅色絡合物在540nm處有明顯吸收峰,吸光度在一定范圍內與血清蛋白含量呈正比關系,經與同樣處理的蛋白質標準液比較。即可求得蛋白質含量。