方法名稱(chēng)： 靈芝子珍珠口服液—腺苷的測(cè)定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定靈芝子珍珠口服液中腺苷的含量。

本方法適用于靈芝子珍珠口服液。

方法原理： 取供試品加甲醇，超聲處理，放置待沉淀完全，濾過(guò)，取許濾液蒸干，殘?jiān)铀芙?，以水飽和的正丁醇提取，正丁醇提取液蒸干，殘?jiān)?0%甲醇溶解并定容，搖勻，作為供試品溶液。注入高效液相色譜儀，以紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm，記錄腺苷的響應(yīng)值，計(jì)算其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 正丁醇

儀器設(shè)備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Hypersil C18 (250 ×4.6mm, 5μm)。

1.3紫外檢測(cè)器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相： 甲醇 磷酸鹽緩沖液（pH 6.5） = 10 1

2.3 柱溫：30℃

2.4 檢測(cè)波長(zhǎng)：260nm

2.5 流速：1.0mL/min

試樣制備： 1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取腺苷對(duì)照品適量，加甲醇配制成1mL含40μg的對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品20mL置100mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻超聲處理5分鐘，放置待沉淀完全，濾過(guò)，取許濾液50mL蒸干，殘?jiān)铀?0mL溶解，以水飽和的正丁醇提取4次，合并正丁醇提取液蒸干，殘?jiān)?0%甲醇溶解并定容至5mL，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制

精密吸取上述對(duì)照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL注入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外檢測(cè)器檢測(cè)器，于260nm檢測(cè)腺苷的吸收值，以腺苷的進(jìn)樣量對(duì)其峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取上述供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，以紫外檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為260nm，記錄腺苷的響應(yīng)值，計(jì)算其含量。