脯氨酸測定

方法名稱： 脯氨酸的測定—電位滴定法

應用范圍： 本方法采用滴定法測定脯氨酸的含量。本方法適用于脯氨酸。

方法原理： 供試品加冰醋酸溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，記錄高氯酸滴定液的使用量，計算，即得。

試劑：

1. 水（新沸放置至室溫）

2. 高氯酸滴定液（0.1mol/L）

3. 冰醋酸

4. 基準鄰苯二甲酸氫鉀

5.結(jié)晶紫指示液

6. 醋酐

7. 醋酸汞試液

試樣制備：

① 高氯酸滴定液（0.1mol/L）

配制：取無水冰醋酸（按含水量計算，每1g水加醋酐5.22mL)750mL，加入高氯酸（70%-72%）8.5mL，搖勻，在室溫下緩緩滴加醋酐23mL，邊加邊搖，加完后再振搖均勻，放冷，加無水冰醋酸適量使成1000mL，搖勻，放置24小時。若所測供試品易乙?；瑒t須用水份測定法測定本頁的含水量，再用水和醋酐調(diào)節(jié)至本液的含水量為0.01%-0.2%。

標定：取在105℃干燥至恒重的基準鄰苯二甲酸氫鉀約0.16g，精密稱定，加無水冰醋酸20mL使溶解，加結(jié)晶紫指示液1滴，用本液緩緩滴定至藍色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于20.42mg的鄰苯二甲酸氫鉀。根據(jù)本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量，算出本液的濃度，即可。

貯藏：置棕色玻璃瓶中，密閉保存。

②結(jié)晶紫指示液

取結(jié)晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解，即得。

操作步驟： 精密稱取供試品0.1g，加冰醋酸50mL溶解后，照電位滴定法，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正，記錄消耗高氯酸滴定液的體積數(shù)（mL），每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于11.51mg的脯氨酸（C5H9NO2），即得。

注1：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一,“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.657。

性狀檢驗

酸度測定： 取本品2.0g，加水20ml溶解后，依法測定，pH值應為5.9～6.9。

溶液透光度測定： 取本品1.0g，加水10ml溶解后，照分光光度法，在430nm的波長處測定透光率，不得低于98.0%。

氯化物檢驗：取本品0.25g，依法檢查，與標準氯化鈉溶液5.0ml制成的對照液比較，不得更濃(0.02%)。

硫酸鹽檢驗：取本品1.0g，依法檢查，與標準硫酸鉀溶液2.0ml制成的對照液比較，不得更濃(0.02%)。銨鹽 取本品0.1g，依法檢查，與標準氯化銨溶液2.0ml制成的對照液比較，不得更深(0.02%)。

其他氨基酸檢驗：取本品，加水制成每1ml中含50mg的溶液,作為供試品溶液；精密量取適量，加水稀釋成每1ml中含0.25mg的溶液，作為對照溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2μl,分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇－無水乙醇－濃氨溶液－水(8:8:1:3)為展開劑，展開后，晾干,噴以茚三酮的丙酮溶液(1→50)，在80℃干燥約10分鐘,立即檢視，供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點的顏色，與對照溶液的主斑點比較，不得更深(0.5%)。干燥失重 取本品，在105℃干燥3小時，減失重量不得過0.3%。

熾灼殘渣：不得過0.1%。

鐵鹽檢驗：取本品1.0g，依法檢查，與標準鐵溶液1.0ml制成的對照液比較，不得更深(0.001%)。重金屬 取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依法檢查，含重金屬不得過百萬分之十。

砷鹽檢驗：取本品2.0g，加鹽酸5ml與水23ml溶解后，依法檢查(附錄Ⅷ J第一法），應符合規(guī)定(0.0001%)。

熱原檢驗：取本品,加氯化鈉注射液制成每1ml中含45mg的溶液,依法檢查(附錄Ⅺ D），劑量按家兔體重每1kg注射10ml，應符合規(guī)定（供注射用）。

本品為吡咯烷-2-羧酸。按干燥品計算，含C5H9NO2不得少于98.5%。