方法名稱：

注射用頭孢他啶－頭孢他啶－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定注射用頭孢他啶中頭孢他啶的含量。

本方法適用于注射用頭孢他啶。

方法原理：

供試品經(jīng)水溶解并定量稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)頭孢他啶的峰面積，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 乙腈

2. pH7.0磷酸鹽緩沖液

儀器設(shè)備：

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按頭孢他啶峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：乙腈 pH7.0磷酸鹽緩沖液 水=40 200 1760

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.3 柱溫：室溫

2.4 流速：1.5mL/min

試樣制備：

1. pH7.0磷酸鹽緩沖液

稱取無水磷酸氫二鈉42.59g、磷酸二氫鉀27.22g，加水溶解并稀釋至1000mL溶解。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取頭孢他啶對(duì)照品適量，加水制成每1mL中約含1mg的溶液，搖勻，作為儲(chǔ)備液，臨用前精密量取15mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即為對(duì)照品溶液。

3.供試品溶液的制備

取供試品10瓶，分別加水溶解并定量稀釋制成每1mL中含頭孢他啶1mg的溶液，臨用前精密量取15mL，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)254nm處測(cè)定頭孢他啶（C22H22N6O7S2）的峰面積，計(jì)算出其含量，并求出10瓶的平均含量。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.135。