從50年代中期開始，臨床酶學有了迅速的發(fā)展，幾乎把當時能測的酶都在臨床上試用過，企圖通過測定某一種或某幾種酶來診斷一些特定疾病或特定組織器官的病變。通過10余年廣泛的研究，發(fā)現酶測定診斷疾病的特異性并不高，因為機體中各種細胞的代謝有很大的相似性，從臨床角度很難說存在著所謂器官特異酶。當時曾有學者想找出一些腫瘤特異酶，但很快發(fā)現找不到一種只存在于腫瘤組織并能進入血液而正常組織又不存在的酶。

在此同時，Market等通過對LD在電泳時可分為5個區(qū)帶的深入研究，在1959年首先提出“isozyme”的術語來描述一類酶，它們催化同一生化反應，但在結構和理化性質上有所不同，目前廣泛使用國際生化協會推薦術語“isoenzyme”。醫(yī)學教|育網搜集整理我國目前多翻譯為同工酶，臨床很快將此新概念、新發(fā)現用于臨床，發(fā)現同工酶測定可以彌補上述測酶總活性的不足之處，因為不同同工酶在組織分布、細胞內定位、發(fā)生發(fā)育方面都可能有所差異，臨床可利用這些差異來增加診斷的特異性。目前不論在診斷腫瘤，還是診斷心臟、肝等疾病上都找到一些較總酶活性測定特異性、靈敏度高的同工酶測定項目，同工酶正逐步成為酶學中一個重要分支。

80年代發(fā)現某些同工酶從組織進入體液后，進一步變化分為數個不同類型即所謂同工酶的亞型（isoform）。CK-MB的亞型MB1、MB2，CK-MM亞型MM1、MM2和MM3在AMI的診斷和溶栓療效判斷上都優(yōu)于總酶和同工酶。

同工酶是一個復雜的生物現象，至今在分類、概念上尚有一些問題有待研究澄清。從臨床診斷角度可將同工酶理解為一個包括有多種能催化相同生化反應的酶族，在這族中雖然不同酶都催化同一反應，但在理化性質上有差異，如它們對底物的親和性、特異性不同，對抑制劑出現不同的反應，所帶電荷、對熱耐受性有差異等等。生化學者根據這些差異用各種物理、化學方法將同工酶分離測定，從本質上說這些差異與酶蛋白結構有關，或者是構成酶蛋白的氨基酸在組成或排列次序上出現差異，或者由于二級、三級乃至四級結構不同而造成上述不同的理化性質，同時這些結構差異又可引起酶蛋白抗原性的差異。目前正在大力發(fā)展這種用免疫方法測同工酶的技術，并取得明顯進展。