分子生物學(xué)方法是一類(lèi)利用細(xì)胞因子的基因探針檢測(cè)特定細(xì)胞因子基因表達(dá)的技術(shù)。目前所有公認(rèn)的細(xì)胞因子的基因均已克隆化，故能較容易地得到某一細(xì)胞因子的cDNA探針或根據(jù)已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探針。利用基因探針檢測(cè)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的方法多種多樣，常使用斑點(diǎn)雜交、Northernblot、逆轉(zhuǎn)錄PCR，細(xì)胞或組織原位雜交等。實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在于制備高質(zhì)量的核酸探針和獲得合格的待測(cè)物（提取的mRNA樣品或細(xì)胞/組織標(biāo)本）。核酸探針是指一段用放射性同位素或其他標(biāo)記物（如生物素、地高辛等）標(biāo)記并與目的基因互補(bǔ)的DNA片段或單鏈DNA、RNA.根據(jù)其來(lái)源可分為cDNA探針、寡核核苷酸探針、基因組基因探針及DNA探針等。其中cDNA探針和人工合成寡核苷酸探針常用于斑點(diǎn)雜交及Northern blot，而RNA探針因穿透性好更適用于原位雜交。核酸醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理探針技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)程序化，以cDNA探針為例主要包括：

　?。?）質(zhì)粒DNA的提取；

　　（2）靶DNA片段的分離；

　　（3）靶DNA片段標(biāo)記；

　?。?）待測(cè)樣品mRNA的提??；

　?。?）標(biāo)記cDNA探針對(duì)待檢樣品的雜交；

　?。?）放射自顯影或顯色分析。

　　近年來(lái)出現(xiàn)的RT-PCR檢測(cè)特異性mRNA的方法也廣泛用于細(xì)胞因子研究領(lǐng)域。該法具有靈敏、快速等優(yōu)點(diǎn)，甚至從1～10個(gè)細(xì)胞中就可檢出其中的特異mRNA.