【摘要】本研究探討用丙型肝炎病毒（HCV）核心抗原酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)（HCV-cAgELISA）篩查獻(xiàn)血員感染HCV的可行性。對(duì)我醫(yī)院2003年1月-2005年12月間的8677份獻(xiàn)血者血清標(biāo)本進(jìn)行抗-HCV初檢和復(fù)檢。將僅初檢陽(yáng)性的15份血清標(biāo)本和僅復(fù)檢陽(yáng)性的14份血清標(biāo)本，分別再做HCV-cAgELISA和HCVRT-PCR檢測(cè)。結(jié)果表明：經(jīng)HCV-cAgELISA檢測(cè)，29份僅初檢（15份）和僅復(fù)檢（14份）抗-HCV陽(yáng)性血清標(biāo)本中只有5份結(jié)果為陽(yáng)性，陽(yáng)性率為17.24%.經(jīng)HCVRT-PCR檢測(cè)，29份僅初檢和僅復(fù)檢抗-HCV陽(yáng)性血清標(biāo)本中同樣也只有5份陽(yáng)性結(jié)果，陽(yáng)性率也為17.24%.結(jié)論：HCV-cAgELISA檢測(cè)技術(shù)的敏感性與HCVRT-PCR技術(shù)類(lèi)似，但成本明顯降低，有可能作為HCV感染的輔助確證試驗(yàn)，或作為抗-HCV檢測(cè)技術(shù)的更新?lián)Q代技術(shù)用于安全輸血中獻(xiàn)血者血液的篩查。

　　【關(guān)鍵詞】丙型肝炎病毒

　　目前臨床上主要用抗-HCVELISA技術(shù)篩檢獻(xiàn)血者的HCV感染狀況。盡管使用的抗-HCVELISA試劑盒均為國(guó)家“批批檢”合格產(chǎn)品，但由于廠家之間使用HCV基因重組抗原質(zhì)量及各抗原片段包被比例的不同，各廠家試劑間的靈敏度和特異性存在著一定差異，從而導(dǎo)致抗-HCV檢測(cè)結(jié)果不一致，易產(chǎn)生假陽(yáng)性或漏檢等情況。我們從2003年1月-2005年12月采用兩家廠商生產(chǎn)的抗-HCVELISA試劑對(duì)8677份獻(xiàn)血者血清標(biāo)本進(jìn)行了初檢和復(fù)檢，對(duì)僅初檢或復(fù)檢抗-HCV陽(yáng)性血清標(biāo)本又用HCV-cAgELISA技術(shù)和HCVRT-PCR技術(shù)進(jìn)行了檢測(cè)，以探討HCV-cAgELISA技術(shù)作為臨床HCV感染的輔助確證試驗(yàn)，或作為抗-HCV檢測(cè)技術(shù)的更新?lián)Q代技術(shù)用于安全輸血中獻(xiàn)血員篩查的可行性，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

　　材料和方法

　　標(biāo)本來(lái)源

　　血清標(biāo)本均來(lái)自本院血站獻(xiàn)血者，經(jīng)抗-HCVELISA試劑初、復(fù)檢后，將所需標(biāo)本分裝并置-80℃條件下存放，確保被檢標(biāo)本僅凍融一次。

　　質(zhì)控品

　　抗-HCV質(zhì)控血清由衛(wèi)生部臨床檢測(cè)中心提供（批號(hào)0412，0503等），2NCU/ml。

　　試劑

　　用于初檢和復(fù)檢的抗-HCVELISA診斷試劑分別由廈門(mén)新創(chuàng)公司（批號(hào)為2004095805和2005025801）和上?？迫A公司（批號(hào)為20041203和20050317）提供，HCV-cAgELISA試劑由湖南景達(dá)基因公司提供（批號(hào)為050920）；HCVRT-PCR熒光定量試劑由上?？迫A公司提供（批號(hào)為20050920）。

　　主要儀器

　　洗板機(jī)（ST-36Ｗ）和酶標(biāo)儀（ST-360）均為上海科華實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)。PCR擴(kuò)增儀型號(hào)為L(zhǎng)ightCyclerII。

　　方法

　　8677份獻(xiàn)血者血清標(biāo)本經(jīng)抗-HCVELISA試劑初、復(fù)檢后，將僅初檢或復(fù)檢陽(yáng)性的血清標(biāo)本用同批號(hào)試劑做雙孔復(fù)查，確定陽(yáng)性結(jié)果的標(biāo)本再用HCV-cAgELISA技術(shù)和HCVRT-PCR技術(shù)檢測(cè)。具體操作方法和結(jié)果判斷，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行。

　　統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用χ2檢驗(yàn)。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理

　　結(jié)果

　　8677名獻(xiàn)血者的血清標(biāo)本經(jīng)抗-HCVELISA技術(shù)檢測(cè)后，結(jié)果見(jiàn)表1。Table 1. Results of anti-HCV in donor’s serum samples detected by ELISA（略）

　　對(duì)其中15份僅初檢和14份僅復(fù)檢抗-HCV陽(yáng)性血清標(biāo)本分別進(jìn)行HCV-cAgELISA檢測(cè)和HCVRT-PCR檢測(cè)。結(jié)果表明，在29份僅初檢和僅復(fù)檢抗-HCV陽(yáng)性血清標(biāo)本中，抗原檢測(cè)陽(yáng)性為5份，核酸檢測(cè)陽(yáng)性也為5份，兩種方法檢測(cè)結(jié)果基本相符（表2）。Table 2. Results detected by  HCV-cAg ELISA and HCV RT-PCR （略）

　　討論

　　在第三代抗-HCVELISA技術(shù)中的包被抗原主要包括HCV-core，NS3，NS4和NS5等，其中大部分為基因工程表達(dá)抗原，雖然其特異性和靈敏度都比較高［1］，但由于各廠商所用抗原質(zhì)量和各抗原片段包被比例的不同，因此生產(chǎn)的試劑在靈敏度和特異性方面存在一定差異，從而導(dǎo)致抗-HCV結(jié)果的不一致，易產(chǎn)生漏檢和假陽(yáng)性等情況［2］。為提高檢出的準(zhǔn)確性，有必要尋找一種快速、便捷的輔助確證診斷技術(shù)。

　　HCV侵入人體后，血液中首先出現(xiàn)的是HCV抗原，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后才可能產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。國(guó)內(nèi)外近幾年來(lái)探索應(yīng)用HCV-cAg檢測(cè)HCV的報(bào)道較多［4，5］。本研究應(yīng)用的HCV-cAgELISA法對(duì)僅初檢陽(yáng)性的15份和僅復(fù)檢陽(yáng)性的14份血清標(biāo)本分別進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果顯示，抗原檢測(cè)陽(yáng)性率比文獻(xiàn)報(bào)道的在抗-HCV陽(yáng)性標(biāo)本中HCV-cAg陽(yáng)性率（為34.48%）明顯要高［5］。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理

　　應(yīng)用RT-PCR技術(shù)對(duì)僅初檢或僅復(fù)檢抗-HCV陽(yáng)性的29份血清標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果與HCV-cAgELISA法結(jié)果相同。雖然PCR技術(shù)特異性強(qiáng)，靈敏度高，是HCV感染輔助確證技術(shù)之一，但該方法操作復(fù)雜、費(fèi)用高。比較而言，HCV-cAgELISA法快速、便捷，較適用于安全輸血中獻(xiàn)血者的血液篩檢。

　　HCV-cAgELISA技術(shù)與抗-HCV有互補(bǔ)作用，二者同時(shí)檢測(cè)能提高HCV檢出結(jié)果的準(zhǔn)確性，可明顯降低抗-HCV檢測(cè)的假陽(yáng)性，減少血液資源的浪費(fèi)，當(dāng)然這還有待進(jìn)一步研究。

　　【參考文獻(xiàn)】

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