方法名稱： 瓦松－槲皮素、山柰素的測定－高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定瓦松中槲皮素、山柰素的含量。

本方法適用于景天科植物瓦松Orostachys fimbriatus (Turcz.) Berg.的干燥地上部分。

方法原理： 本品粉末置具塞錐形瓶中，加甲醇-25%鹽酸溶液（4：1）的混合溶液，水浴回流，冷卻，用甲醇補重，搖勻，濾過，續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長360nm處檢測槲皮素、山柰素的吸收值，計算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 甲醇-25%鹽酸溶液（4：1）的混合溶液

3. 0.5%磷酸溶液

儀器設備： 1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按槲皮素峰計算應不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：甲醇 0.5%磷酸溶液=47 53

2.2檢測波長：360nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末（過三號篩）1g, 為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取槲皮素對照品、山柰素對照品適量，加甲醇制成每1mL含槲皮素10mg、山柰素20mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品粉末（過三號篩）約1g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-25%鹽酸溶液（4：1）混合溶液50mL，密塞，稱定重量，置水浴中回流1小時，立即冷卻，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液10mL和供試品溶液10~20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長360nm處測定槲皮素（C15H10O7）和山柰素（C15H10O6）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005版，一部，p47。