在培養(yǎng)古尼蟲草時培養(yǎng)基要考慮:氮源、碳源、水、常量及微量元素等多方面營養(yǎng)要求。①碳源:在三糖、多糖及其它碳源中,馬鈴薯粉作碳源時,其生物量最高,且古尼蟲草菌絲體為純白色;②氮源:無機(jī)氮(氯化銨、硝酸鈉和硫酸銨等)和有機(jī)氮(蛋白胨、酵母粉、牛肉膏等),經(jīng)實(shí)驗(yàn)分析效果最好的氮源是NaN03;③微量元素:經(jīng)試驗(yàn)分析在所試用濃度范圍內(nèi)的微量元素對古尼蟲草菌絲體的生長沒有明顯的影響。
液體發(fā)酵法用古尼擬青霉孢子懸液分別定量接種于I、Ⅱ號培養(yǎng)基中,在25。C靜置15d后取出,烘干,得菌絲發(fā)酵物;在工業(yè)上利用深層發(fā)酵法,用古尼擬青霉孢子懸浮于25℃的培養(yǎng)條件下,在一級種子罐發(fā)酵2d后,轉(zhuǎn)入二級罐發(fā)酵2d采收、過濾,進(jìn)行低溫烘干得干菌絲體。
固體培養(yǎng)法
在對古尼蟲草培養(yǎng)時,注意其生活史及生長所需要的條件,如溫度、濕度等因子。在對古尼擬青霉進(jìn)行培養(yǎng)時,用古尼擬青霉孢子懸液,分別定量接種到培養(yǎng)基后,在不同溫度下培養(yǎng)15d后,取出置40vC低溫烘干,即得培養(yǎng)物。傅嵐等在對古尼蟲草菌絲體深層發(fā)酵培養(yǎng)基條件研究時,確定以馬鈴薯20%、蛋白胨1%、葡萄糖2%、硫酸鎂0.1%、磷酸二氫鉀0.05%和0.1%為最佳發(fā)酵培養(yǎng)基,搖床培養(yǎng)基條件為:溫度25~26℃,轉(zhuǎn)速150r/min,pH6.5,搖床震蕩培養(yǎng)120h,20L發(fā)酵罐中最佳發(fā)酵周期為66hF73。