方法名稱： 阿替洛爾原料藥－阿替洛爾－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定阿替洛爾原料藥中阿替洛爾的含量。

本方法適用于阿替洛爾原料藥。

方法原理： 供試品經(jīng)流動(dòng)相溶解并定量稀釋，加入內(nèi)標(biāo)后再經(jīng)流動(dòng)相稀釋，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)275nm處檢測(cè)阿替洛爾的峰面積，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 磷酸鹽緩沖液

2. 甲醇

3. 辛烷磺酸鈉

4. 非那西丁

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按阿替洛爾峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液 甲醇=7 3，每1000mL中含辛烷磺酸鈉1.30g

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：275nm

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 磷酸鹽緩沖液

取磷酸二氫鉀6.8g，加水溶解并稀釋至1000mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0。

2. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取非那西丁適量，加流動(dòng)相制成每1mL中含80µg的溶液，即為內(nèi)標(biāo)溶液。

3. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取阿替洛爾對(duì)照品適量，加流動(dòng)相適量，超聲處理20分鐘使溶解，用流動(dòng)相定量稀釋成每1mL中含0.32mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5mL，置25mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為對(duì)照品溶液。

4. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加流動(dòng)相適量，超聲處理20分鐘使溶解，用流動(dòng)相定量稀釋成每1mL中含0.32mg的溶液，精密量取該溶液與內(nèi)標(biāo)溶液各5mL，置25mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)275nm處測(cè)定阿替洛爾（C14H22N2O3）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.299。