對(duì)照品溶液的制備 精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品250mg,置100ml量瓶中,加無(wú)水乙醇適量,溶解并稀釋至刻度,搖勻。精密量取10ml,置100ml量瓶中,加無(wú)水乙醇稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml含無(wú)水蘆丁0.25mg)。 標(biāo)準(zhǔn)典線的制備 精密吸取對(duì)照品溶液0.0ml,1.0ml,2.0ml,3.0ml,4.0ml,5.0ml,分別置于25ml量瓶中,各加無(wú)水乙醇至5ml,分別依次加入5%亞硝酸鈉溶液1.0ml,使混勻,放置6分鐘,加10%硝酸鋁溶液1.0ml,搖勻,放置6分鐘,加氫氧化鈉試液15.0ml,再加無(wú)水乙醇至刻度,搖勻,放置15分鐘,以第一支量瓶(即0.0ml)為空白,照紫外分光光度法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄Ⅴ A)試驗(yàn),在500nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度,以吸收度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并計(jì)算得回歸方程。 測(cè)定法 取本品10粒的內(nèi)容物,精密稱定,研細(xì),取0.6g,精密稱定,加無(wú)水乙醇30ml,水浴加熱回流1小時(shí),趁熱過(guò)濾,取濾液置100ml量瓶中,用30ml無(wú)水乙醇分次洗滌燒瓶及濾器(15ml、10ml、5ml),合并洗滌液,置于量瓶中,放冷至室溫,加無(wú)水乙醇至刻度,搖勻,精密吸取5ml,另取無(wú)水乙醇5ml(作空白)分別置于25ml容量瓶中,照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下“分別依次加入5%亞硝酸鈉溶液1.0ml”起,依法測(cè)定吸收度,根據(jù)回歸方程計(jì)算得蘆丁的含量(注:加入氫氧化鈉試液后,如有沉淀,60℃水浴加熱使溶解)。 本品每粒含總黃酮以蘆丁(C27H30O16)計(jì),應(yīng)不少于3mg。