方法名稱:菝葜-薯蕷皂苷元的測定-高效液相色譜法
應用范圍:該方法采用高效液相色譜法測定菝葜中薯蕷皂苷元的含量。
該方法適用于百合科植物菝葜Smilax china L.的干燥根莖。
方法原理:該品加乙醇在索氏體取器中加熱回流,回收溶劑濃縮加鹽酸加熱回流,冷卻液加石油醚振搖,提取液蒸干,殘渣加乙腈溶解并定容,搖勻,濾過,續(xù)濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長203nm處檢測薯蕷皂苷元的吸收值,計算出其含量。
試劑:
1. 乙腈
2 .乙醇
3 .鹽酸
4 .石油醚
儀器設備:
1 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按薯蕷皂苷元峰計算應不低于8000。
1.3 紫外吸收檢測器
2色譜條件
2.1流動相:乙腈 水=90 10
2.2檢測波長:203nm
2.3柱溫:35℃
試樣制備:
1. 稱取供試品精密稱定該品粉末(過二號篩)8g,為供試品。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取薯蕷皂苷元對照品適量,加乙腈制成每1mL含0.2mg的溶液。
3. 供試品溶液的制備
取該品粉末(過二號篩)約8g,精密稱定,置索氏提取器中,加乙醇適量,浸漬過夜,加熱回流至提取液近無色,回收溶劑至約100mL,加鹽酸16mL,加熱回流水解2小時,冷卻,用石油醚(60~90℃)振搖提取4次,每次40 mL, 合并提取液,回收溶劑至干,殘渣加乙腈溶解并轉移至10mL量瓶中,加乙腈至刻度,搖勻,濾過,續(xù)濾液作為供試品溶液。
操作步驟:分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長203nm處測定薯蕷皂苷元(C27H42O3)的峰面積,計算出其含量。