方法名稱：

腦得生片－人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的測定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測定腦得生片中人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的含量。

本方法適用于中成藥腦得生片。

方法原理：

本品經(jīng)超聲處理，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長203nm處檢測人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1的吸收值，計算出其含量。

試劑：

1.乙腈

2.正丁醇

3..氨試液

4 ,甲醇

儀器設(shè)備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按人參皂苷Rg1計算應(yīng)不低于8000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙腈為流動相A，水為流動相B

時間（分鐘）

流動相A（%）

流動相B（%）

0~20

20→40

80→60

20~26

20

80

2.2檢測波長：203nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備：

1. 稱取供試品

取本品20片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，取約1g，精密稱定，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷Rb1對照品、人參皂苷Rg1對照品、三七皂苷R1對照品適量，分別加甲醇制成每1mL含人參皂苷Rb10.75mg、人參皂苷Rg10.75mg、三七皂苷R10.15mg的混合溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品，置具塞錐形瓶中，精密加入水飽和的正丁醇50mL，密塞，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）20分鐘，放冷，再稱定重量，用水飽和的正丁醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25 mL，置分液漏斗中，加氨試液洗滌2次（15 mL，10 mL），取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。

操作步驟：

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長203nm處測定人參皂苷Rg1（C42H72O14）、人參皂苷Rb1（C54H92O23）、三七皂苷R1（C47H80O18）的峰面積，計算出其含量。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p572。