方法名稱： 牛黃上清丸–黃芩苷的測定--高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定牛黃上清丸中黃芩苷的含量。

本方法適用于中成藥牛黃上清丸。

方法原理： 供試品加稀乙醇超聲處理后，置水浴上回流提取，并補充丟失的溶劑量，取上清液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長280nm處檢測黃芩苷的吸收值，計算出其含量。

試劑： 1. 甲醇

2. 磷酸

3. 稀乙醇

儀器設(shè)備： 1 儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論板數(shù)按黃芩苷峰計應(yīng)不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水 磷酸 = 40 60 0.2

2.2 檢測波長：280nm

2.3 柱溫：室溫

3 超聲波發(fā)生器

試樣制備： 1.稀乙醇

取乙醇529mL，加水稀釋至1000mL，即得。

2. 稱取供試品

取本品，剪碎，精密稱取1g。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取在600C減壓干燥4小時的黃芩苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含60μg的溶液。

4. 供試品溶液的制備

供試品精密加稀乙醇50mL，稱定重量，超聲處理30分鐘，置水浴上回流3小時，放冷，稱定重量，用稀乙醇補充丟失的溶劑量，靜置，取上清液為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μL，注入高效液相色譜儀，紫外吸收檢測器，于波長280nm處測定黃芩苷（C21H18O11）的吸收值，計算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p.378。