1.試驗方法將分離的反應細胞（通常是患者的淋巴細胞）與刺激細胞（通常是供者或已知的標準淋巴細胞）配制成1×10⁶/ml濃度的懸液，各加0.2ml到反應管中；放置37℃和5％CO₂環(huán)境下培養(yǎng)5～6天。培養(yǎng)結束后進行涂片染色，觀察并計數(shù)轉(zhuǎn)化的淋巴細胞；也可在培養(yǎng)結束前5～12小時加入3H-TdR，收獲后用液體閃爍儀計數(shù)細胞的放射性。試驗結果的常用表示方式是刺激指數(shù)（SI）。 

MLC分為雙向法和單向法。雙向MLC是反應管中兩種細胞都有應答能力，可以互為刺激細胞和反應細胞，試驗結果是兩種細胞反應之和。

SI＝2×試驗管cpm/（A對照cpm＋B對照cpm）

雙向MLC只能反映兩種細胞間LD的差別，結果比較模糊，也不能做LD抗原的分型。單向MLC是將刺激細胞用絲裂霉素C（mitomycinC）或X線照射先行滅活，但細胞的抗原性保持不變，因此可作為刺激細胞而不能作為反應細胞，試驗結果是待檢測細胞的反應，使于結果分析。

SI＝試驗管cpm/自身對照cpm

單向MLC可以用來進行HLD-D和DP位點的分型試驗，常用的方法有兩類：醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理純合子分型細胞（homozygoustypingcell，HTC）試驗和預敏淋巴細胞分型（primedlymphocytetyping，PLT）試驗。

2.HTC試驗HTC是指細胞內(nèi)一對同源染色體上兩個HLA單倍型完全相同，所以該位點在細胞表面只表達一種抗原；HTC可從近親婚配的子代表中尋找。將一組HTC經(jīng)處理來活后作為刺激細胞，與待檢細胞做單向MLC.如果待檢細胞與刺激細胞的LD不同，就會發(fā)生反應；如果相同便不反應；所以試驗又稱為陰性分型法。當SI≤2時可認為待檢細胞與該管HTC的LD抗原相同。本法的缺點是HTC難以得到，而且培養(yǎng)時間長（5～6天），在尸體器官移植時不能應用。