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方法名稱:
桂附地黃丸-馬錢苷的測定-高效液相色譜法
應(yīng)用范圍:
該方法采用高效液相色譜法測定桂附地黃丸中馬錢苷的含量。
該方法適用于中成藥桂附地黃丸。
方法原理:
該品經(jīng)甲醇超聲處理后,搖勻,濾過,續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長236nm處檢測馬錢苷的吸收值,計算出其含量。
試劑:
1. 甲醇
2. 乙腈
3. 0.05%磷酸溶液
儀器設(shè)備:
1 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,理論塔板數(shù)按馬錢苷計算應(yīng)不低于4000。
1.3 紫外吸收檢測器
2色譜條件
2.1流動相:乙腈為流動相A,0.05%磷酸溶液為流動相B
時間(分鐘)
流動相A(%)
流動相B(%)
0~20
11
89
20~30
90
10
30~40
11
89
2.2檢測波長:236nm
2.3柱溫:30℃
試樣制備:
1. 稱取供試品
取該品水蜜丸,研碎,取約1g,精密稱定;或取小蜜丸或重量差異項下的大蜜丸,剪碎,混勻,取約1g,精密稱定,為供試品。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取馬錢苷對照品適量,加甲醇制成每1mL含20mg溶液。
3. 供試品溶液的制備
供試品,置具塞錐形瓶中,精密加入甲醇50mL,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率33kHz)45分鐘,放冷,再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過。精密量取續(xù)濾液25mL(剩余的續(xù)濾液備用),蒸干,殘渣用甲醇溶解,并轉(zhuǎn)移至5mL量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,濾過,取續(xù)濾液作為供試品溶液。
操作步驟:
分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL,注入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器于波長236nm處測定馬錢苷(C17H26O10)的峰面積,計算出其含量。
參考文獻(xiàn):
中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學(xué)工業(yè)出版社,2005版,一部,p556。