氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)

　?。?）加熱沉淀試驗：加熱煮沸 →混濁或沉淀 （蛋白質(zhì)）+5%H₂SO₄（不加熱）→混濁或沉淀

　?。?）雙縮脲反應：+40%NaOH，1%CuSO₄ →紫色、紅色或紫紅色（多肽、蛋白質(zhì)）

　　（3）茚三酮反應：+0.2%茚三酮試液 →藍或藍紫色（氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)）

　?。?）吲哚醌反應：+吲哚醌試液 →各種顏色（氨基酸）

　?。?）Millon反應：+Hg，H₂NO₂ →紅色（蛋白質(zhì)分子中有酪氨酸組成）

　?。?）Hopkins-Cole反應：+乙醛酸，濃硫酸 →各色（蛋白質(zhì)分子中有色氨酸組成）

　　（7）氨基酸的薄層層析檢查：吸附劑——硅膠G

　　展開劑—— n-BuOH，n-BuOH：HAc：H₂O

　　顯色劑——0.25%茚三酮試液 →紫紅色斑點

　?。?）加熱或礦酸試驗：取檢品的水溶液1ml于試管中，加熱至沸或加5％鹽酸，如發(fā)生混濁或有沉淀示含有水溶性蛋白質(zhì)。

　?。?）縮二脲試驗：取檢品的水溶液1ml，加10％氧化鈉溶液2滴，充分搖勻，逐漸加入硫酸銅試液，隨加搖勻，注意觀察，如呈現(xiàn)紫色或紫紅色示可能含有蛋白質(zhì)和氨基酸。

　　凡蛋白質(zhì)結構中含有兩個或兩個以上肽鍵（－CONH－）者均有此反應，能在堿性溶液中與Cu²⁺[醫(yī).學敎育網(wǎng)搜集整理]生成絡合物，呈現(xiàn)一系列的顏色反應，二肽呈藍色，三肽呈紫色，加肽以上呈紅色，肽鍵越多顏色越紅。

　　（3）茚三酮試驗，取檢品的水溶液1ml，加入茚三酮試液2－3滴，加熱煮沸4－5分鐘，待其冷卻，呈現(xiàn)紅色棕色或藍紫色（蛋白質(zhì)、胨類、肽類及氨基酸）。

　　氨基酸與茚三酮的水合作物作用，氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳，而茚三酮被還原成仲醇，與所后成的氨及另一分子茚三酮縮合生成有藍紫色的化合物。

　　【注】

　?、佘崛噭┲饕嵌嚯暮桶被岬娘@色劑，反應在1小時內(nèi)穩(wěn)定。試劑溶液pH值以5－7為宜，必要時可加吡啶數(shù)滴或醋酸鈉調(diào)整。

　?、诖朔磻浅ｌ`敏，但有個別氨基酸不能呈紫色，而呈黃色，如脯氨酸。

　?。?）氨基酸薄層層析檢出反應：

　?、傥絼汗枘zG。

　　②展開劑：（1）正丁醇：水（1：1）（2）正丁醇：醋酸：水（4：1：5）

　?、埏@色劑：0.5％茚三酮丙酮溶液，噴霧后于1100烘箱放置5分鐘，顯藍紫允或紫色。