核酸的變性|復(fù)性|雜交：

1.核酸變性

核酸變性是指核酸雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)，氫鍵斷裂，但并不涉及核苷酸間磷酸二酯鍵的斷裂。若磷酸二酯鍵的斷裂稱為降解，核酸降解時(shí)，核酸分子量降低。而核酸的變性并不引起核酸分子量的變化。

引起核酸變性的因素很多。由于溫度升高而引起的變性稱熱變性。如將DNA的稀鹽溶液加熱到50℃以上幾分鐘，雙螺旋結(jié)構(gòu)即破壞，氫鍵斷裂，DNA分子的兩條鏈彼此分離，形成無(wú)規(guī)則線團(tuán)。變性后的DNA，由于結(jié)構(gòu)上的變化，因而發(fā)生了一系列理化性質(zhì)的改變，如260nm處紫外吸收值升高（稱增色效應(yīng)），粘度降低以及生物學(xué)活性喪失等。能使50%DNA分子發(fā)生變性的溫度稱為變性溫度（Tm）.Tm一般為70-85℃。Tm值與分子中G-C含量有關(guān)，即G-C配對(duì)數(shù)愈多，則Tm值愈高，反之愈低。由于溶液酸堿度的改變而引起的變性稱酸堿變性。對(duì)DNA分子來(lái)說(shuō)，堿基對(duì)在pH4.0-11.0之間最為穩(wěn)定，超此范圍，可引起DNA分子酸堿變性。乙酸、丙酮等有機(jī)溶液及尿素也可引起核酸的變性。

2.核酸復(fù)性

變性DNA在適當(dāng)條件下，又可使兩條彼此分離的鏈重新締合而形成雙螺旋結(jié)構(gòu)，這一過(guò)程稱為復(fù)性或退火。復(fù)性后的DNA可基本恢復(fù)一系列的理化性質(zhì)，生物學(xué)活性也可得到部分恢復(fù)醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

變性核酸的復(fù)性是有條件的。如將熱變性的DNA溶液驟然冷低溫，DNA不可能復(fù)性。只有緩慢地將它冷卻時(shí)，DNA才有可能復(fù)性。另外，變性DNA片段越大，則復(fù)性越慢。變性DNA濃度越大則越易復(fù)性。

3.核酸雜交

不同來(lái)源的DNA加熱變性后，只要兩條多核苷酸鏈的堿基有一定數(shù)量能彼此互補(bǔ)，就可以經(jīng)退火處理復(fù)性現(xiàn)象，形成新的雜交體雙螺旋結(jié)構(gòu)，這種依據(jù)相應(yīng)堿基配對(duì)而使不完全互補(bǔ)的兩條鏈相互結(jié)合稱為分子雜交。因此分子雜交的基礎(chǔ)是DNA的變性與互補(bǔ)，也可以雜交形成新的雙螺旋結(jié)構(gòu)。目前雜交技術(shù)已廣泛地應(yīng)用于核酸結(jié)構(gòu)與功能的研究醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。將已知的特定基因（如先天性遺傳疾病的某些特定基因）用同位素標(biāo)記，制備成基因探針，利用分子雜交技術(shù)，基因探針可與同源序列互補(bǔ)形成雜交體，因此可用檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)有無(wú)特定基因或DNA片段，如臨床上已應(yīng)用于產(chǎn)前診斷遺傳性疾病。